Alimento vivo na dieta de larvas de zebrafish (Danio rerio)
michelle da Silva Almeida1, vanessa Lewandowski2, Jaísa casetta3, Natália galoro leite4, Caio Froemming5, Paula Flores6, Ricardo pereira ribeiro7, Lauro Vargas mendez8
1 - universidade estadual de maringá
2 - universidade estadual de maringá
3 - universidade estadual de maringá
4 - universidade estadual de maringá
5 - universiade estadual de maringá
6 - universidade estadual de maringá
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8 - universidade estadual de maringá
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RESUMO -
O objetivo do estudo foi avaliar períodos de fornecimento de nauplios de artêmia em relação ao comprimento e sobrevivência de larvas de zebrafish (Danio rerio). Avaliou-se quatro períodos de fornecimento de alimento vivo, sendo o tratamento controle (sem fornecimento de alimento vivo), até 30, 45 e 60 dias pós fertilização. Após 60 dias as larvas foram alimentadas somente com ração comercial, sem o fornecimento de artêmia. Para aferição do comprimento e sobrevivência, elas foram fotografadas semanalmente até 60 dias e posteriormente aos 90 dias e analisadas com auxílio do software Image J. Os dados foram submetidos a análise de variância pelo software Statistica 7.0. As larvas alimentadas com nauplios de artêmia apresentaram maior crescimento em comparação às alimentadas somente com ração, até o período de 60 dias. Aos 90 dias não foi verificada diferença significativa entre as mesmas. Não foi observada diferença significativa entre a sobrevivência das larvas em relação aos tratamentos.
Palavras-chave: Nauplios de artêmia, crescimento, sobrevivência
Live food in the diet of zebrafish larvae (Danio rerio)
ABSTRACT - The aim of the study was to evaluate supply periods Artemia nauplii compared to the length and survival of the zebrafish larvae (Danio rerio). It was evaluated 4 periods of live food supply, being the control treatment (without food supply), until 30, 45 and 60 days after fertilization. After 60 days the larvae were fed only commercial feed, without the supply of artemia. For length gauging and survival, they were photographed weekly up to 60 days and after 90 days and analyzed using Image J software. Data were submitted to analysis of variance by software Statistica 7.0. The larvae fed with artemia nauplii presented higher growth in comparison with those fed with ration only, until the period of 60 days. At 90 days, there was no significant difference between them. No significant difference was observed between larval survival and treatments.Keywords: artemia nauplii, growth, survival
Introdução
O peixe Dani rerio conhecido popularmente como zebrafish tem se destacado cada vez mais como modelo animal.Ele é um peixe de água doce pertencente à família Ciprinidae, sendo encontrado naturalmente no sul e sudeste da Ásia, aos redores dos rios Ganges e Brahmaputra (Spence et al.,2006). Caracteriza-se por habitar águas rasas e lentas, às margens de córregos e valas, particularmente adjacentes a campos de arroz (Menon, 1999). Apresenta pequeno porte, chegando a aproximadamente 4cm de comprimento e coloração distinta com listras claras e escuras alternadas pelo corpo (Spence et al., 2008) Um dos principais fatores que fazem com que o Zebrafish seja amplamente utilizado em pesquisas científicas é o fato de possuir o genoma totalmente sequenciado e apresentar 71% dos genes semelhantes aos genes humanos (Vilella et al., 2008). Além disso, é um peixe pequeno, robusto, produz grande número de prole, podendo reproduzir o ano todo se cultivado em condições adequadas e apresenta baixo custo de manutenção em laboratório (Spence et al., 2007). No entanto, algumas etapas de manejo e criação desse animal ainda não estão totalmente esclarecidas (Lawrence et al., 2012). Dessa forma, o objetivo do estudo foi avaliar diferentes períodos de fornecimento de alimento vivo (nauplios de artêmia) em relação ao comprimento e sobrevivência de larvas de zebrafish (Danio rerio).Revisão Bibliográfica
Os estudos envolvendo a experimentação animal demonstram elevada importância para o desenvolvimento da ciência e tecnologia nas diferentes áreas científicas (Chorilli et al., 2007). Além de pesquisas em questões específicas de cultivo e domesticação, certos animais são considerados e utilizados como modelo, principalmente em investigações biomédicas relacionados ao desenvolvimento de drogas, onde os resultados obtidos a partir das mesmas podem ser transcritos para outros organismos (van Meer et al., 2015). Segundo esses autores, inúmeros avanços observados em diferentes áreas científicas só foram possibilitados por meio da utilização de modelos animais como instrumento de pesquisa. O peixe Dani rerio conhecido popularmente como zebrafish tem se destacado cada vez mais como modelo animal. A sua utilização como ferramenta de estudo teve elevado crescimento a partir dos anos 2000, especialmente nas áreas de biomedicina, neurofisiologia, genética e desenvolvimento embrionário. Ele é um peixe de água doce pertencente à família Ciprinidae, sendo encontrado naturalmente no sul e sudeste da Ásia, aos redores dos rios Ganges e Brahmaputra (Spence et al.,2006). Caracteriza-se por habitar águas rasas e lentas, às margens de córregos e valas, particularmente adjacentes a campos de arroz (Menon, 1999). Apresenta pequeno porte, chegando a aproximadamente 4cm de comprimento e coloração distinta com listras claras e escuras alternadas pelo corpo (Spence et al., 2008) Um dos principais fatores que fazem com que o Zebrafish seja amplamente utilizado em pesquisas científicas é o fato de possuir o genoma totalmente sequenciado e apresentar 71% dos genes semelhantes aos genes humanos (Vilella et al., 2008). Além disso, é um peixe pequeno, robusto, produz grande número de prole, podendo reproduzir o ano todo se cultivado em condições adequadas e apresenta baixo custo de manutenção em laboratório (Spence et al., 2007). No entanto, algumas etapas de manejo e criação desse animal ainda não estão totalmente esclarecidas (Lawrence et al., 2012). Dessa forma, o objetivo do estudo foi avaliar diferentes períodos de fornecimento de alimento vivo (nauplios de artêmia) em relação ao comprimento e sobrevivência de larvas de zebrafish (Danio rerio).Materiais e Métodos
O experimento foi realizado no Laboratório de Zebrafish da Universidade Estadual de Maringá por um período de 90 dias. Foram utilizados 6 casais para obtenção dos embriões e larvas. Foram utilizadas 400 larvas distribuídas em 20 estruturas de plástico contendo 1,5L de água, com aeração constante. Os tratamentos basearam-se em 4 períodos de fornecimento de nauplios de artêmia para as larvas de zebrafish, sendo o tratamento controle (sem fornecimento de alimento vivo), até 30 dpf (dias após a fertilização), 45dpf e 60 dpf, consistindo em 4 tratamentos e 5 repetições. O estudo foi divido em duas etapas, sendo que na primeira foi avaliado crescimento e sobrevivência das larvas submetidas à diferentes períodos de fornecimento de nauplios de artêmia, enquanto que na segunda etapa foram avaliados os mesmos parâmetros, sendo fornecido à todas as larvas somente ração comercial de alta qualidade nutricional. O arraçoamento foi realizado três vezes ao dia (08:00, 14:00 e 17:00) diluindo-se a ração em água para facilitar a ingestão do alimento pelas larvas, sendo fornecida com auxílio de uma pipeta de Pasteur. A alimentação exógena com nauplios de artêmia foi iniciada ao 12dpf duas vezes ao dia (08:00 e 17:00) e mantidas conforme o fornecimento estabelecido pelos tratamentos. Até o período experimental de 60 dias, as larvas foram fotografadas semanalmente para realização da avaliação do comprimento (mm). Em seguida, elas foram fotografadas e analisadas com 90 dias, nos quais os últimos 30 dias foi fornecido somente ração comercial micro extrusada Bernaqua, contendo 57% de proteína à todos os grupos avaliados, cessando o fornecimento de nauplios de artêmia. A avaliação do comprimento das larvas foi realizado com auxílio do software Image J. Os dados foram submetidos a análise de variância (p < 0,05) pelo software Statistica 7.0. Ao ser verificado diferença entre os tratamentos, foi aplicado o teste de Tukey para comparação de médias.Resultados e Discussão
Os resultados obtidos em relação ao crescimento das larvas demonstram que à partir de 28 dias, os animais que foram alimentados com nauplios de artêmia apresentaram crescimento maior (p < 0,05) em comparação aos animais alimentados somente com ração (Tabela 1). Esse comportamento foi verificado até 60º dia de estudo, sem diferenciação entre os tratamentos com fornecimento de alimento vivo. Ao final do período experimental, os valores de comprimento não diferiram estatisticamente (p > 0,05) entre os tratamentos. A sobrevivência das larvas não foi influenciada significativamente (p > 0,05) pelo fornecimento de alimento vivo (Figura 1). O período de maior mortalidade registrada foi entre 12 e 20 dias para todos os tratamentos. Os primeiros 20 dias de cultivo caracteriza-se por ser os mais críticos para larvas de zebrafish, em virtude do consumo do vitelo e necessidade de ingerir alimentos exógenos, o que é dificultado devido ao tamanho da boca das mesmas, que inviabiliza o consumo de vários tipos de alimentos. O manejo alimentar é um item fundamental no processo de cultivo do zebrafish (Lawrence et al., 2012). No presente estudo, foi observado que durante o período que as larvas foram alimentadas com nauplios de artêmia e ração farelada diluída, os animais que receberam esse alimento vivo apresentam maior comprimento, o que pode ser explicado pelo fato de que a artêmia possui elevada qualidade nutricional (Cestarolli et al., 1997). A ração diluída fornecida aos animais pode perder qualidade em virtude do processo de lixiviação. No entanto, nessa fase de desenvolvimento, o tamanho da boca das larvas não permite o consumo de dietas granuladas. Após 60 dias, com o fornecimento de dieta granulada de alto valor nutricional, observou-se que as larvas mantidas somente com ração tiveram um ganho compensatório e aumentaram de tamanho, não diferindo estatisticamente daquelas que receberam alimento vivo. O resultado do presente estudo corroboram com os resultados obtidos por Carvalho et al. (2006), os quais demonstraram que larvas de zebrafish podem ser cultivadas somente com alimento seco.Conclusões
O fornecimento de alimento vivo proporciona maior crescimento das larvas até 60 dias. O arraçoamento com dieta balanceada e de qualidade, pode substituir o fornecimento de alimento vivo após 60 dias sem causar prejuízos ao crescimento dos peixes.Gráficos e Tabelas
